Page 59 - 2025年第56卷第10期
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(1)前期驯养。实验河道注水后晾晒 3 d,并确保河道水深不低于 0.5 m,pH 值稳定在 7 ~ 8 之间,
水体溶解氧浓度达到 6 mg/L 以上。通过水温调节装置使各实验河道达到目标水温,水温误差不超
过±0.2 ℃。各实验河道投入实验鱼均不少于 10 条。实验鱼实验前驯养 3 d,以适应实验环境,保持
活性。
(2)流场调节。水泵开启后,通过调整水泵流量和整流栅闸门开度,将各实验河道流速稳定在目
标流速,误差不超过±0.02 m/s。
(3)水流刺激。流场稳定后,对实验鱼群进行间隔水流刺激,单次刺激 3 h 后休息 1 h,每日进行 5
组实验,实验周期 10 d。同时,分别在实验第 5、10 d(实验周期结束),挑选活性较好的 4 ~ 5 条实验
鱼,进行生物学测量和尾部静脉抽血,记录体重、体长、性腺、重量等指标。
(4)血 清 样 本 提 取 。 对 实 验 鱼 麻 醉 后 进 行 尾 部 静 脉 抽 血 , 使 用 HERMLE Z326 型 低 温 离 心 机 以
10 000 r/min 的速度离心 5 min,取其上部清液存入 2 ml 封闭试剂管中。为防止偶然误差,每个实验情
景的血清样本不低于 8 个。
(5)性 激 素 浓 度 测 定 。 以 血 清 中 雌 二 醇(E2)、 睾 酮(T)浓 度 作 为 测 量 指 标 , 采 用 酶 标 抗 体 法
(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)进行分析测试,在 450 nm 波长下用酶标仪分别测定雌二醇和睾
酮吸光度,并基于标准品吸光度计算样品浓度。
2.3 数据处理方法 (1)基础数据分析:计算各实验鱼雌二醇浓度、睾酮浓度相比对照组增长幅度,
计算公式如下:
ΔE = (E - E ) /E (1)
exp control control
ΔT = (T - T ) /T (2)
exp control control
式中:ΔE 为雌二醇浓度增幅,%;E 、E 分别为实验组、对照组雌二醇浓度,pg/ml;ΔT 为睾酮浓
exp control
度增幅,%;T 、T 分别为实验组、对照组睾酮浓度,pg/ml。
exp control
(2)显著性和相对重要性分析:通过方差分析,确定水温、流速及二者交互作用对 ΔE 和 ΔT 的 F
值和显著性水平;采用多元线性回归模型,分别建立 ΔE 和 ΔT 随水温、流速变化的回归方程;通过对
比多元线性回归模型的标准化回归指数,分析水温、流速对 ΔE 和 ΔT 的相对重要性;采用 R 语言
relaimpo 回归模型,定量分析水温和流速对 ΔE 和 ΔT 的贡献率。
3 实验结果分析
3.1 性激素浓度随水温变化规律 不同水温情景下雌二醇浓度增幅(ΔE)、睾酮浓度增幅(ΔT)统计结
果如图 2 所示。在 12 ~ 22 ℃的水温范围内,在相同的水流刺激下,随着水温上升,草鱼体内的性激素
浓度呈现波动增加趋势。12 ℃水温时,即水流刺激组的雌二醇和睾酮浓度与静水对照组相比无明显差
异,表明在该水温条件下,水流刺激对草鱼性腺发育没有显著影响;当水温超过 14 ℃后,实验鱼雌二
醇浓度逐步升高,尤其是在 16 ~ 20 ℃水温区间,超过 90% 实验鱼的雌二醇浓度显著高于静水对照组,
证实了水温升高对草鱼性激素分泌和性腺发育具有促进作用。
12 ~ 22 ℃的水温范围内,在低(0.3 m/s)、中(0.6 m/s)、高(0.9 m/s)三种不同流速刺激下,ΔE 和
ΔT 均随水温上升呈现先增加、后减少的变化特征:
(1)在低、中流速刺激下,ΔE 的平均值在 16 ℃达到上升拐点,随后分别稳定在 10% 和 30%(即实
验组平均雌二醇浓度相比对照组增加 10% 和 30%,下同);当水温升高至 22 ℃时,ΔE 显著下降,均值
降幅超过三分之一。而在高流速刺激下,ΔE 的上升拐点则提前到 14℃,且在 14 ~ 22 ℃区间 ΔE 均值稳
定在 30% 左右。
(2)在低、中流速刺激下,ΔT 变化趋势与 ΔE 类似,同样是在水温达到 16 ℃左右 ΔT 出现上升拐
点。但 14 ℃时,低、中、高流速刺激下 ΔT 均值都低于 5%;超过 20 ℃后,ΔT 仍呈现下降趋势,但其
下降幅度远低于 ΔE。
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